تأثير إضافة السكروز والتريها لوز في الكفاءة الإخصابية للسائل المنوي المجمد لكباش العواس

Abstract

الملخص أُجريت الدراسة لتحديد تأثير نسبتي الحمل والولادة بـ 1) إضافة السكروز والتريهالوز إلى ممددات السائل المنوي، 2) إضافة rFSH أو eCG أو تراكيز مختلفة من hMG منفردة أو بالمشاركة مع eCG في سياق برنامج Ovsynch، 3) مستوى الغلوكوز والغليسيريدات الثلاثية حول وقت التلقيح، إضافة إلى تحديد تأثير موجهات المناسل آنفة الذكر في بعض المؤشرات الاستقلابية المهمة. مُدّد السائل المنوي المجموع باستخدام المهبل الاصطناعي بمحاليل تمديد معتمدة على صفار البيض، أُضيف إليها تركيز مختلف من السكروز والتريهالوز منفردين أو مجتمعين معاً قبل التجميد. قُيّمت المؤشرات الحركية للسائل المنوي حاسوبياً باستخدام الـ CASA لُقّحت 63 نعجة صنعياً بعد توزيعها عشوائياً إلى سبع مجموعات متساوية العدد، وووقت الإباضة عندها باستخدام برنامج Ovsynch بالمشاركة مع الهرمونات آنفة الذكر لتحريض النمو الجريبي. تمت مراقبة الجريبات المبيضية بجهاز الأمواج فوق الصوتية المزود بمسبار خطي عبر المستقيم بتردد MHz 7.5. جُمعت عينات الدم من الوريد الوداجي للنعاج، ولمدة خمسة أيام بدءاً من يوم حقن PGF₂ₐ وموجهات المناسل، وقِيست مستويات كل من الغلوكوز والغليسيريدات الثلاثية والكولسترول واليوريا باستخدام المطياف الضوئي، تم كشف الشبق بعد حقن الجرعة الثانية من هرمون GnRH بمعدل مرة كل 8 ساعات حتى بعد انتهاء ظهور علامات الشبق. شُخّص الحمل بجهاز الأمواج فوق الصوتية في اليوم 37 بعد التلقيح. حُلّلت البيانات الناتجة باستخدام برنامج 9.2 ®SAS. قورنت الفروقات بين متوسطات المؤشرات المدروسة بحسب اختبار TUKEY المدرج ضمن تعليمة GLIMMIX. بالرغم من أن نتائج التحليل الحاسوبي CASA لم تسجل فروقاً إحصائية (P>0.05) بين المجموعات في مؤشر الحركة العامة للنطف بعد الإذابة بـ 10 دقائق، إلا أن أفضل النتائج كانت عند استخدام السكروز أو التريهالوز بتركيز 50 ملي مول، وبلغت الحركة العامة 68.33% و68.00% على التوالي. أدت إضافة واقيات البرودة بتراكيز مرتفعة (100 ملي مول) إلى انخفاض معدل الحركة العامة، وكان الانخفاض كبيراً (P<0.05) عند تركيز 100 ملي مول من السكروز. لم يكن لإضافة واقيات البرودة منفردة تأثير إيجابي معنوي (P>0.05) بخصوص نسبة النطف ذات الحركة السريعة أو المتوسطة أو البطيئة أو الساكنة بعد إذابة القشات بـ 10 دقائق، إلا أن مشاركة السكروز والتريهالوز معاً أدت إلى زيادة كبيرة (P<0.05) في نسبة النطف ذات الحركة السريعة التي بلغت %18.67، وفي معدل سرعة مسار النطف الذي بلغ 75.67 ميكروناً/ثا، وفي متوسط السرعة الخطية المستقيمة للنطف التي بلغت 135.33 ميكروناً/ثا، ولكنها أدت إلى انخفاض معنوي (P=0.03) في متوسط سرعة مسار النطف بعد 45 دقيقة من الإذابة. يمكن القول عموماً إن النطف حافظت على مؤشراتها الحركية بعد 45 دقيقة من الإذابة ولم تُسجّل انخفاضات كبيرة (P>0.05) فيها. كما يلاحظ تقارب نسبة الحمل في المجموعات التي أُضيف لها السكروز أو التريهالوز منفرداً سواء بتركيز منخفض أو مرتفع، وكانت نسبة الحمل الأعلى في المجموعة التي أُضيف إليها كلا واقيي البرودة (السكروز والتريهالوز) إذ بلغت 77.78%. كذلك لم تسجل فروق معنوية في معدل الولادات بين المجموعات التجريبية، وكانت أقل نسبة في مجموعتي الشاهد والسكروز بتركيز مرتفع إذ بلغت 44.45%. لم تُسجل أي فروق معنوية (P>0.05) في متوسطات أعداد الجريبات متوسطة الحجم على مبايض نعاج مجموعات الدراسة بعد 24 ساعة من حقن موجه المناسل، إلا أن الفروق تمايزت بعد 48 ساعة، وكانت أكثر أعداد الجريبات عند مجموعة hG5، وبلغت أعدادها 9.6 جريبات متوسطاً، وأقلها عند مجموعة hMG25، وبلغت أعدادها 6.33 جريبات. لم يسجل وجود جريبات كبيرة الحجم عند ابتداء المعاملة الهرمونية أو بعده بـ 24 ساعة عند نعاج جميع المجموعات، وسُجل وجود جريبات كبيرة الحجم عند نعاج المجموعات المعاملة بمستويات مرتفعة من موجهي المناسل hMG و rFSH (مجموعة hMG25 و FSH25) فقط، إذ بلغت أعداد الجريبات الكبيرة 3.5 و3.17 جريباً على التوالي، كان قطر الجريب الإباضي عند نعاج معظم المجموعات متقارباً (P>0.05) ماعدا نعاج مجموعة hMG15 والتي بلغ قطر الجريب الإباضي فيها بعد المعاملة الهرمونية بـ 48 ساعة 5 مم. كان النمو الجريبي بعد 24 ساعة من حقن موجهات المناسل eCG أو hMG أو rFSH متقارباً عند نعاج جميع المجموعات، ولم ترتق الاختلافات بين المجموعات إلى مستوى المعنوية الإحصائية (p>0.05) ماعدا مجموعتي rFSH و hMG15 (p<0.05) اللتين بلغ عندهما متوسط النمو الجريبي بين 1.10 و1.52مم/اليوم على التوالي. كان التباين أكثر وضوحاً (p<0.05) بين بعض المجموعات بعد 48 ساعة من حقن موجهات المناسل، إذ أدى حقن eCG بمفرده أو بالمشاركة مع hMG إلى أعلى نمو جريبي في المجموعات وبلغ متوسط النمو الجريبي اليومي 1.95 و2.23 مم على التوالي، وكان أقل معدل نمو جريبي عند النعاج المعاملة بـ 15 وحدة دولية من hMG، وبلغ 1.31 مم/اليوم. كما لم تؤثر مشاركة موجهات المناسل مع برنامج توقيت الإباضة معنوياً (P>0.05) في نسبة الحمل والولادة عند النعاج. أظهرت جميع نعاج الشبق في أوقات متقاربة، ولم تُسجل فروق إحصائية (p>0.05) بين المجموعات في بدايته أو نهايته. كذلك لم تُسجل فروق إحصائية (p>0.05) بمستوى الطاقة سواء كانت غلوكوز أم غليسيريدات ثلاثية عند النعاج الحوامل وغير الحوامل، فقد تأرجح تركيزهما انخفاضاً وارتفاعاً حول القيمة الفيزيولوجية لكل منهما. إضافة لذلك لم تؤثر المعاملة بمختلف موجهات المناسل في المؤشرات الاستقلابية الكولسترول واليوريا عند نعاج العواس. يُستنتج من الدراسة الحالية أنه بالرغم من إضافة السكروز والتريهالوز لمحلول تمديد السائل المنوي أدت إلى تحسن بعض المؤشرات الحركية للنطف إلا أنها لم تؤد إلى زيادة معنوية في معدلي الحمل والولادات، ولم يُسجل تأثير تضامني بينهما. وأنه يمكن استخدام مختلف موجهات المناسل بالمشاركة مع برنامج توقيت الإباضة دون أن تؤثر في نسبتي الحمل والولادة. وأن نسبة الحمل والولادة لم تتأثرا سلباً بمستوى الغلوكوز والغليسيريدات الثلاثية، كما أن استخدام موجهات المناسل آمن، ولم يؤثرا في معدلات الاستقلاب عند نعاج العواس. الكلمات المفتاحية: كباش العواس، التريهالوز، السكروز، CASA، eCG ،hMG ،rFSH ،Ovsynch، الغلوكوز، الغليسيريدات الثلاثية.