دور جزيء C-di-GMP في التحكم في الفوعة لدى البروسيلا الضانية Brucella melitensis في الزجاج والجسم الحي فئران BALB/C)

Abstract

بعد الحليب من الأوساط الغذائية الحاملة للعديد من الجراثيم الممرضة، ويعزى تلوثه إلى عدة أسباب كالتهاب الضرع لدى الأبقار، وإجراءات الانتاج والتسويق وأدوات جمعه وإلى العاملين في الحظائر والتسويق ومعامل الألبان، ويرتبط ظهور العوامل الممرضة في الحليب بطرائق مباشرة ناجمة عن إصابة الحيوان بالعدوى أو غير مباشرة من خلال تلوث البيئة تعد البروسيلا الضائية Brucella melitensis من الجراثيم الممرضة التي توجد في الحليب وتسبب الإجهاض والعقم عند المضيف وهي من الجراثيم سلبية الغرام، وهي غير متبوعة وغير متحركة ولاهوائية اختبارية وداخل خلوية ممرضة، وتسبب عدوى ذات منشأ حيواني تعرف بداء البروسيلات cydic dimeric (3-5) guanosine يمثل جزيء ثنائي الغوانوزين أحادي الفوسفات الحلقي Brucellosis وأكثرها شيوعاً لدى Secondary messengers واحداً من أهم الرسل الثانوية monophosphate (c-di-GMP( الأنواع الجرثومية وينظم العديد من العمليات الخلوية، مثل تشكيل الرقاقات الحيوية Biofilm والحركة والقوعة Virulence ودورة حياة الخلية Cell cycle والتمايز Differentiation وغيرها هدفت هذه الدراسة إلى معرفة دور جزيء odi-GMP في التحكم في مستوى الفوعة عند البروسيلا الضانية من خلال تحديد ثلاثة مورثات cgs ، pdB pd) ترمز للمجالات البروتينية التي تدخل في تركيب هذا الجزيء ثم حذفها للحصول على سلالات مطفرة تتباين في شدة فوعتها وتحديد السلالة الموهنة التي يمكن استعمالها كلفاح تجريبي استعملت في هذه الدراسة سلالات البروسيلا الضائية والإشريكية القولونية Esherichia coli DHsa والسلالة اللقاحية .. 1.melitensis Rev والبلاسميد DONR/Zeo وجمعت 94 عينة حليب خام بهدف عزل بعض السلالات المحلية للبروسيلا الضانية كما استعملت السلالة 16 melitensis . في كافة مراحل العمل الجزيئية. استخدمت سلسلة من الاختبارات الحيوية الكيميائية Biochemical tests لتحديد هوية المستعمرات الجرثومية المعزولة من الحليب كما استخدمت بادنات Primers للتحري عن المورثة hp المميزة الجنس البروسيلا و cgsB المميزة للبروسيلا الضانية عند العزلة R5 صممت عدة مجموعات من البادثات النوعية المراحل العمل الجزيئية في تضخيم المورثات المستهدفة ogs-F&R bpdB-F& RbpdA-F&R( استخدمت المجموعة الأولى bpdA-Down-bpd-Up-F&R( عند السلامة 16 ثم استخدمت المبادئات cgs bpd bpd بالتطير