الكشف الجزيئي النوعي والكمي عن البروتينات الحيوانية والنباتية الداخلة في اللحوم المصنعة في الأسواق السورية

Abstract

هدف البحث إلى تحديد هوية اللحوم الداخلة في خلطات منتجات اللحوم المصنعة الموجودة في السوق السورية المحلية، للتحقق من مصداقية بطاقة البيان الخاصة بها من خلال تطبيق تقنية هضم ناتج تضخيم الدنا بأنزيمات قطع محددة (PCR-RFLP)، وكذلك الكشف عن فول الصويا والتحري عن وجود المواد المعدلة وراثياً فيها من خلال استثمار تقنيات الـ PCR. جمعت خمس وعشرون عينة من منتجات اللحوم المصنعة ولحوم معاملة حرارياً بشكل عشوائي، بسطرمة روستو، سلامي نقانق لانشون هوت دوغ، كباب وشقف في عام 2018 نقذ البحث في مخابر الهيئة العامة التقانة الحيوية ومخابر كلية الهندسة الزراعية. تم تحديد نوع اللحوم الداخلة في العينات المدروسة من خلال تضخيم دنا جزء من المورثة الميتوكوندرية mt12SrDNA باستخدام بادئ عام عوملت منتجات التضخيم بخمسة أنزيمات قطع من النمط الثاني Apol Mspl hal All و BspTI وقورنت أنماط القطع الخاصة بالعينات مع أنماط القطع الخاصة بعينات مرجعية كشاهد ايجابي. تم الكشف عن وجود فول الصويا في منتجات اللحوم من خلال تضخيم مورثة اللكتين المميزة لفول الصويا. تم تحديد فيما إذا كان فول الصويا في العينات الإيجابية معدل وراثياً أم لا، من خلال استهداف سلاسل تنظيمية خاصة بمورثات التعديل الوراثي (promoter, NOS terminator 35)، ومن ثم التحري عن المورثة المعدلة وراثياً المقاومة المبيدات والموجودة في فول الصويا المعدل وراثياً من النوع تم أيضاً تقدير نسبة CaMV35S promoter من خلال تضخيم الـ Roundup Ready Soybean (RR( البروتينات الكلية المنحلة. أظهرت النتائج أن سبعة عشر عينة كانت مطابقة لبطاقة البيان الخاصة بها، بينما كانت ثمان عينات غير مطابقة لبطاقة البيان الخاصة بها من حيث نوع اللحوم الداخلة في تصنيعها. كما أظهرت النتائج أن أحد عشر عينة كانت إيجابية لمورثة اللكتين ومتوافقة مع بطاقة البيان وأربع عينات كانت سلبية المورثة اللكتين وغير متوافقة مع بطاقة البيان. كما أن عشر عينات كانت تحوي مواد معدلة وراثياً، ثلاث عينات منها تحوي فول الصويا من النوع RR تراوحت كمية البروتينات الكلية المنحلة في معظم العينات بين 1-1.3 ملغ غ)، مما يعني أن هذه العينات تحوي نسب جيدة من اللحوم و / أو البروتينات النباتية. بينما تراوحت في ثلاث عينات بين (0.2-0.9) ملغ غ) مما يعني أن هذه العينات تحوي الحد الأدنى من اللحوم والبروتينات النباتية. تعد تقنية PCR-RLFP رخيصة نسبياً ودقيقة وهي حساسة وسريعة مما يؤهلها كتقنية هامة وعملية لتحديد هوية ومنشأ أنواع اللحوم. كما أن استهداف مورثة اللكتين والـ CaMVi35S promoter معاً بطريقة الـ Duplex PCR قادرة بكفاءة على الكشف عن فول الصويا المعدل وراثياً المقاومة المبيدات مما يوفر الوقت والتكلفة.