دراسة مقارنة للتقانات المختلفة المستخدمة في تشخيص الليشمانيا الجلدية

Abstract

الملخص الهدف: يتم تشخيص الليشمانيا الجلدية في سورية وفقاً للطرائق التقليدية حيث تعتبر طريقتي الفحص المجهري والزرع الأكثر شيوعاً بسبب نوعيتهما العالية، ولكن تعاني هذه الطرائق من عدة مساوئ ومن أهمها أنها منخفضة الحساسية، وتحتاج زمناً طويلاً، وغير قادرة على تحديد نوع الطفيليات المسببة للخمج . لذلك تهدف هذه الدراسة إلى تطبيق طريقة تضخيم الدنا، التي أثبتت حساسية ونوعية عالية في مجموعة من الدراسات العالمية على عينات محلية ومقارنتها مع الفحص المجهري، والزرع من حيث الحساسية والسرعة في الانجاز وقدرتها على تنميط الطفيليات على مستوى النوع. المواد والطرائق أخذت 70 عينة سريرية من مراجعي مشفى الأمراض الجلدية والزهرية الجامعي بدمشق، يشك باصابتهم بالليشمانيا الجلدية وفقاً للمظاهر السريرية. وطبقت أربعة اختبارات على كل عينة، شملت الفحص المجهري للطاخة ملونة بتلوين غمزا، والزرع على وسط NNN، وتضخيم دنا منشأ الحركة المعزول من العينات السريرية مباشرة، وتضخيم المجال ITS1 وتنميط الطفيليات بطريقة RFLP. النتائج أظهرت نتائج الفحص المجهري حساسية قدرها 72.9% إذ تمكن من اثبات الايجابية لدى 51 عينة من أصل 70 وحقق الزرع حساسية قدرها 68.6% إذ تمكن من اثبات الايجابية لدى 48 عينة من أصل 70 في حين أظهر الDNA PR حساسية أعلى وقدرها 100% إذ أثبت الايجابية لدى كل العينات السبعين المختبرة، كما أظهر ITS1 PCR حساسية قدرها %100 وتمكن من اثبات ايجابية العينات السبعين المختبرة. كما أظهرت نتائج RFLP أن جميع الطفيليات كانت من نوع الليشمانيا المدارية .Ltropica الاستنتاج: تبين من خلال هذه الدراسة أنه يجب استخدام طريقة تضخيم دنا منشأ الحركة كطريقة تشخيصية ذات حساسية عالية. لذلك يوصى بتطبيقها عند وجود مظاهر سريرية موجهة للاصابة وسلبية في الفحص المجهري والزرع ويجب استخدام طريقة ITS1 PCR عندما يكون تحديد نوع الطفيلي مطلوب، مع الأخذ بعين الإعتبار الطرائق التي تزيد حساسية هذه الطريقة مثل تلوين الهلامة بنترات الفضة. كلمات مفتاحية الليشمانيا الجلدية، PCR ، دنا الصانعة المحركة الزرع الفحص المجهري .KDNA PCR, ITS1-PCR