الكشف عن الفيروسات المرتبطة بالتفاف أوراق الكرمة في جنوب سورية وتحديد نواقلها الحشرية Detection of Grapevine Leafroll-associated closterovirus Southern Syria and their Vectors

Abstract

اعتمدت دراستنا للكشف عن مرض التفاف أوراق الكرمة في جنوب سورية والتعرف على نواقله الحشرية على عدة طرق، دراسة الأعراض الظاهرية، التطعيم على النباتات الدالة، تربية حشرات البق الدقيقي المسجلة عالمياً كنواقل لهذه الفيروسات واجراء العدوى بواستطها، إضافة إلى استخدام الطرق المصلية والطرق الجزيئية - RT PCR للكشف عن هذه الفيروسات. بيئت هذه الدراسة انتشار كل من الفيروسات المرافقة لإلتفاف أوراق الكرمة Grapevine leafroll-associated viruses الفيروس 1 المرافق لإلتفاف أوراق الكرمة (GLRaV1 والفيروس 2 المرافق لإلتفاف أوراق الكرمة (GLRaV2) و الفيروس 3 المرافق لإلتفاف أوراق الكرمة (GLRaV3 على معرشات الكرمة في المحافظات المدروسة ( السويداء، درعا ، القنيطرة) مع الاشارة إلى أن أكبر نسب الإصابة كانت في المجمعات الوراثية مع وجود عدوى مشتركة بهذه الفيروسات. سجلنا وللمرة الأولى وجود الاصابة بالفيروس 6 المرافق لإلتفاف أوراق الكرمة Grapevine leafroll 6 GLRaV6) associated virus) في سورية ( في محافظة السويداء وأثبتنا وللمرة الأولى أيضاً انتقال الفيروس GLRaV3 بحشرات البق الدقيقي Mealybugs اعتمدت هذه النتائج على الدراسة البيولوجية والدراسة المصلية بواسطة ELISA وباستخدام عينات من اللحاء، إذ يسمح اختبار ELISA بالكشف عن الفيروسات بسرعة وسهولة في عصارة النباتات الخشبية، إلا أن هذا الاختبار المصلي لا يملك الحساسية الكافية للكشف عن هذه الفيروسات الموجودة بتراكيز منخفضة في أنسجة اللحاء للعوائل الخشبية، إضافة إلى التوزع غير المتجانس لهذه الفيروسات ضمن شجيرة الكرمة واختلاف تراكيزها من موسم لآخر. إن قدرتنا على استخدام الفيريون كأساس في الاختبارات البيولوجية الجزيئية للكشف عن هذه الفيروسات سمح لنا باستخدام تقانتين معاً، الارتباط المصلي ومن ثم تفاعل RT-PCR حيث سمحت هذه الطريقة بالتخلص من المكونات النباتية المثبطة لأنزيمات تفاعل الـ RT-PCR و الكشف عن التراكيز المنخفضة جداً من الفيروس. إن استخدام هذه الطريقة سمح للمرة الأولى بالكشف عن الفيروس GLRaV3 في عينات أوراق مختلفة من الكرمة في جنوب سورية مع العلم أن اختبار الـ RT-PCR أكثر حساسية بما يزيد بـ 100 مرة من اختبار ELISA. إن التطور والتنوع الكبير في طرق استخدام هذه التقانة يجعل عملية الكشف عن هذه الفيروسات أكثر دقة وسرعة وسهولة، مما يسمح بانتاج مادة إكثار نباتية خالية من الفيروسات.