تأثير الغلوتامين والبرولين وفيتامين B12 في مواصفات السائل المنوي المجمد وقدرته الإخصابية في الماعز الشامي

Abstract

هدف البحث إلى تقييم فاعلية إضافة تراكيز مختلفة من الغلوتامين (٢٥) و ۵۰ میلی مول مل) والبرولين (٢٥) و ۵۰ ميلي مول / مل) وفيتامين B ٢.٥ و ٥ ملغ / مل) إلى محلول تمديد سترات صوديوم وغلوكوز مع صفار البيض المحضر مخبرياً، ومقارنتها مع محلول تمديد تجاري جاهز AndroMed كمحلول قياسي في حفظ السائل المنوي في ذكور الماعز الشامي للوصول إلى المحلول الأفضل والتركيز الأفضل لتحقيق نتائج ولادات أعلى، ونظراً لأن الذكور المستخدمة هي طلائق للتلقيح الصنعي ومعروفة بقدرتها الإخصابية والتشابه الكبير في مواصفات سائلها المنوي جمعت قذفاتها الأربعة واعتبرت كقذفة واحدة في عمليات المداولة.

الغذت الدراسة في ثلاث تجارب في محطة بحوث إزرع التابعة للمركز العربي الدراسات المناطق الجافة والأراضي القاحلة ACSAD على قطيع المعز الشامي خلال الأعوام ۲۰۱۱، ۲۰۱۲ و ۲۰۱۳، حيث جمع السائل المنوي باستخدام المهبل الصنعي مرة واحدة أسبوعياً وبمعدل قذفتين في كل مرة لمدة أربع أشهر خلال الفصل التناسلي من أربعة ذكور بعمر ثلاث سنوات ومتوسط وزن قدره ٥٠٦٨٣ كغ.

قيمت حيوية النطف نسبة النطف ذات الحركة التقدمية) مجهرياً، واستخدمت صبغة ايوزين نيكروزين لتقدير نسبة النطف الميتة، كما قدرت نسبة النطف الشاذة، ومعدل البقاء خلال كل مرحلة من مراحل مداولة السائل المنوي تمديد تبريد تجميد واذابة، واستخدم جهاز CASA تحليل السائل المنوي حاسوبياً لتقدير حركة النطف بأشكالها المتعددة، ولقحت ٦٤ أنثى معز شامي صنعياً بسائل منوي ممدد ومحمد باستخدام أربعة أنواع من محاليل التمديد المختبرة لإختبار أفضلها في تحقيق أعلى معدل ولادات

أظهرت نتائج التجربة الأولى وجود تأثير معنوي (۲۰۰۰) لنوع محلول التمديد في نسبة النطق ذات الحركة التقدمية بعد التمديد والتبريد الجزئي بنحو ٣٠ دقيقة، حيث بلغت النسبة ٧٤، ٥٩، ٥٨، ٥٤، ٦٣ ، ٦٧، ٧١، و ٧٧% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي وانخفضت قليلاً بعد التبريد لدرجة حرارة الثلاجة ٤ م (٢.٥) ساعة تبريد لتصل إلى ٠٦٩ ٥٣ ٥٢ ٤٧ ٥٦ ٦٥،٦١، و ٧٢% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، كما انخفضت معنوياً (....) بعد التجميد والإذابة لتصل إلى ٥٤، ۳۸، ۳۷، ٣٣ ٤٢، ٤٦، ٤٩ و ٥٧% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي. وبلغت نسبة النطف الميتة بعد التمديد بنحو نصف ساعة ٢٣، ٣٥.٤، ۳٥.٦، ۱۰۰۸، ۳۲، ۲۸۰۶، ٢٦.٢ و ٢٠٠٤% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي. وارتفعت قليلاً بعد تمام التبريد إلى ٢٦.٤، ٤٠٠٢، ٤١.٤، ٠٤٦.٨ في التجربة الثانية التي تمت فيها إضافة أفضل التراكيز الناتجة في المرحلة الأولى من الغلوتامين والبرولين وفيتامين B بالطريقة التبادلية والتجميعية إلى محلول التمديد محلي الصنع، بينت النتائج وجود تأثير معنوي (۰۰۰۰) لمحلول التمديد في نسبة النطف ذات الحركة التقدمية بعد التمديد بنحو ٣٠ دقيقة حيث بلغت النسبة ٧٥، ٦١، ۵۰، ۷۰، ٥٤، و ٤٢% في محاليل الأندروميد والسترات دون إضافات، والسترات مضافاً إليه ٢٥ ميلي مول / مل غلوتامين و ۵۰ میلی مول / مل برولين، والسترات مضافاً إليه ٢٥ ميلي مول / مل غلوتامين و ٥ معمل فيتامين B، والسترات مضافاً إليه ٥٠ ميلي مول / مل برولين و ه مع مل فيتامين B، والسترات مضافاً إليه ٢٥ ميلي مول / مل غلوتامين و ۵۰ میلی مول برولين / مل و ٥ معمل فيتامين B على التوالي، وانخفضت نسبة النطف ذات الحركة التقدمية بعد التجميد والإذابة لتصل إلى ۵۵، ۱۰، ۳۱ ٣٤٠٤٥ و ٢٥ في المحاليل سابقة الذكر على التوالي. وكذلك أثر محلول التمديد معنوياً (...) في نسبة النطف الميتة حيث بلغت القيم بعد التمديد بنحو ٣٠ دقيقة ٢١.٦، ٣٢.٤، ٤٢.٤ ٢٦ ، ٣٨.٨، و ٤٩.٦% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، وانخفضت معنوياً بعد التجميد والإذابة لتصل إلى ٣٧.٤ ٥۰، ٥٧.٨، ٤٦.٦، ٥٥ و ٦٢.٦% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، كما أثر محلول التمديد معنوياً (۰۰۰۰ ) في نسبة النطف الشادة التي بلغت ٣٠٤، ٦.٦، ٤،٧.٦، ٧.٢، و ٨.٤% بعد التمديد في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، وارتفعت بعد التجميد والإذابة إلى

٧.٦، ۱۱.۲۰۱۰، ۸.۵، ۱۱، و ١٢.٤% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي.

وبلغ معدل بقاء النطف الكلي بين الجمع والتجميد في هذه المرحلة ٦٤٠٩، ٤٣٠٧، ٣٨.٧ ٠٥٦٠٢ ٤٢.٤، و ٣١.٢% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي.

في هذه التجربة أيضاً قيمت مؤشرات حركة النطف المختلفة باستخدام جهاز CASA، حيث تبين أن المحلول التمديد تأثيراً عالي المعنوية (۰.۰۰۱) في أهم المؤشرات المدروسة كالنسبة العامة للنطف المتحركة (MOT) التي بلغت ۷۱۰۱، ۱۳۰۸، ٥٥.٨، ٦٧.٦، ٥٩.٦ و ٥٠.٢% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، ونسبة النطف ذات الحركة التقدمية (PROG) البالغة ٥٩.٤ ٤٥.٣ ، ٣٧.٣، ٤٧.٦، ٤٢.٤، و ٣٢.١% في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، ومسافة الخط المنحني (DCL) التي بلغت ٤٥.٣، ۳۱.۵، ۲۷.۲ ۳۲.۵، ۳۱۰۲ و ۲۷ ميكرومتر في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، وكذلك السرعة المنحنية للنطف (VCL) التي بلغت ۹۰۰۱، ٧٦.٦، ٦٦.٨ ٧٩.٣، ٧٦، و ٦٥.٤ ميكرومتر / الثانية في المحاليل سابقة الذكر على التوالي، ولم يتميز في هذه المرحلة أي من

محاليل محلية التحضير، وانحسر التفوق للمحلول القياسي AndroMed. في التجربة الثالثة تم تخصيص ٦٤ أنثى من المعز الشامي متوسط أوزانها ٢٠٧٠٥٦ كغ وراوحت أعمارها بين ١.٥ إلى ٥ سنوات، لإختبار فعالية محاليل التمديد المختارة كأفضل محاليل نتيجة التجربتين السابقتين وصولاً إلى أفضل مؤشر للولادات. قسمت الإناث المخصصة بالتساوي إلى أربع مجموعات لتلقيحها صنعياً في عنق الرحم بأفضل المحاليل الناتجة من الفحوصات المخبرية وهي السترات مضافاً إليه ٥ مع مل من فيتامين B، والسترات مضافاً إليه ٥٠ ميلي مول / مل من البرولين، إضافة إلى المحلول القياسي Andromed، والشاهد المحلي (سترات دون إضافات).

بينت النتائج وجود فرق معنوي ((...) في معدل عدم تكرار الشيق معدل الإخصاب الظاهري بين المجموعات الأربعة الملقحة إذ بلغ ٠٥٠٠٦٦٠٧، ٥٣.٣، و ٧٦.٩% في مجموعات الأندروميد والسترات فقط والسترات مع البرولين، والسترات مع فيتامين B على التوالي، وتفوقت إناث المجموعة الرابعة بصورة معنوية (...) على نظيراتها في مج.. ومج، ومج في معدل الولادات (٤٦٠٧، ٣٧.٥، ٤٠، و ٥٣.٦% في المجموعات الأربع على التوالي).

بناء على نتائج هذه الدراسة يمكن اعتماد بعض المحاليل محلية التحضير السترات مضافاً إليه ه مع سل فيتامين (B) بديلاً عن محلول AndroMed التجاري المستورد لتمديد السائل المنوي الذكور المعز الشامي وتجميده، كما يمكن استخدام محاليل السترات مضافاً إليه ٥٠ ميلي مول مل برولين، والسترات مضافاً إليه ٢.٥ مع مل فيتامين B كمحاليل تمديد بالشكل الطازج بهدف زيادة فعالية التلقيح الصنعي الإناث المعز الشامي.

الكلمات المفتاحية المعز الشامي الغلوتامين البرولين، فيتامين B، جهاز الكازاء التلقيحالصنعي معدل الإخصاب، معدل الولادات، سورية.