إنتاج الأجنة خارج الرحم في المعز السوري

Abstract

نقذت الدراسة في مخابر الهيئة العامة للتقانة الحيوية بدمشق خلال الفترة من 2013/3/1 حتى 2014/2/28، بهدف إنتاج الأجنة خارج الرحم في المعز السوري ودراسة تأثير فصل السنة وعمر الحيوان وقطر البويضة في معدل إنضاج البويضات وإخصابها وانقسامها خارج الرحم حتى مرحلة التويتة وتحديد معدل حيويتها بعد التجميد والإذابة. جمعت المبايض من عنزات مذبوحة في المسلخ ووضعت في حافظة تحوي محلول ملح الفوسفات الواقي (PBS) حرارته 37 س مضافاً إليه الجنتامايسين، ونقلت إلى المخبر في مدة لا تتجاوز ساعتين واستخرجت البويضات منها بطريقة تشطيب سطح المبيض مع الغسيل بمحلول PBS، ثم صنفت إلى أربع فئات وفق الحالة الشكلية للنواة والسيتوبلازم وعدد طبقات الخلايا الركامية المحيطة. عزلت بويضات الدرجتين الأولى والثانية وقسمت حسب فصل السنة، وعمر الأم المانحة (1) سنة 1-2 سنة 2 سنة) وقطر البويضة (100)، و 100-110 و 110-120 و 120 مكروناً، واستعملت أوساط تقانة طفل الأنبوب (Ferti Pro. Co. Belgum) لإنضاج بويضات المعز وإخصابها وتنميتها حتى مرحلة التويتة خارج الرحم، وضعت البويضات في طبق يحوي وسط الإنضاج ونقلت إلى حاضنة (5% CO2، رطوبة %95، حرارة 38.5 (س) وتركت فيها لمدة 27 ساعة، ثم نقلت البويضات الناضجة العارية إلى طبق يحوي وسط الإخصاب وأضيفت النطف المهيئة (1.5×10) نطفة مل)، ثم غسلت البويضات للتخلص من بقايا النطف العالقة، وفحصت مجهرياً لملاحظة الجسم القطبي الثاني والبداءتان النوويتان المميزة للإخصاب، نقلت البويضات المخصبة إلى وسط النمو وأعيدت إلى الحاضنة، وفحصت بشكل متكرر كل 24 ساعة لمتابعة الانقسام حتى اليوم السادس، جمدت الأجنة باستخدام مزيج من مانعي التجميد DMSO %15 و 15 بطريقة التزجيج vitrification خللت البيانت لمعرفة تأثير العوامل المدروسة في الصفات المستهدفة، وقورنت المتوسطات وفق اختبار فيشر (test ) بوساطة برنامج 17 SPSS أظهرت النتائج أن طريقة التشطيب سمحت بجمع 1474 بويضة من مبايض مجموعة من المسالخ، وبلغ المعدل العام الإنضاج البويضات 42.54%، وإخصابها 29.35%، ومعدل انقسامها 28.8%، ومعدل حيوية الأجنة بعد التجميد والإذابة 47.17% ، وكان هناك تأثير معنوي (0.01) الفصل السنة وعمر الأم المانحة وقطر البويضة وتأثرها في هذه المعدلات. فشلت البويضات التي جمعت في فصل الشتاء في القدرة على الانقسام والنمو لتكوين أجنة مخبرياً، وفشلت البويضات التي جمعت من مانحات بعمر أقل من سنة وأنضجت وأخصبت وانقسمت في مقاومة إجهادات التجميد والإذابة، ولم تتمكن البويضات التي قطرها أقل من 110 مكروناً في متابعة الانقسام والوصول لمرحلة التويتة تبين أن البويضات التي قطرها أكبر من 110 مكروناً وجمعت في فصلي الصيف والخريف ومن أمهات مانحة بعمر أكبر من سنة كانت هي الأفضل لإنتاج الأجنة مخبرياً والأكثر قدرة على مقاومة ظروف التجميد والإذابة. يستنتج أنه يمكن الاستفادة من العنزات المذبوحة في المسالخ كمصدر منخفض التكلفة في برامج إنتاج أجنة المعز خارج الرحم خلال فصلي الصيف والخريف، ما يتيح فرصة أكبر في تأمين الأجنة لاستخدامها في