اختبار كفاءة نظام LEXSY في إنتاج بروتينات مؤشبة

Abstract

يضبط عامل النمو الشبيه بالأنسولين من النمط الأول IGFI البشري، حادثات بيولوجية عديدة تضمن النمو الصحيحالأعضاء الجسم. تتنوع الأعراض الناتجة عن عوز هذا البروتين بدءاً من اضطرابات النمو حتى القزامة. تعالج جميع هذه الأعراض معالجة معاوضة عن طريق اعطاء المرضى الشكل المؤشب من IGFI الذي تنتجه عادة البكتيريا. رغم الاستعمال الواسع لأنظمة الإنتاج البروتينية المعتمدة على البكتيريا إلا أن لها العديد من المساوئ يتغلب نظام LEXSY، وهو نظام جديد يعتمد على استعمال خلايا الليشمانيا، على معظم مساوئ الأنظمة التقليدية. تتميز الليشمانيا بإنتاج بروتينات بأشكال مماثلة للأشكال الطبيعية من خلال قدرتها على الطي الصحيح للبروتين وعلى انجازها لتعديلات بعد الترجمة استعمل في هذا العمل الحامل PLEXSY لتنسيل الجين المرمزة للـ IGFI وحدها أو المدمجة مع البروتين المتفلور الأخضر عالي الطي IGFP وذلك بطريقتين، تضمن الأولى إنتاج البروتينات ضمن الخلايا بينما تضمن الثانية إفرازها إلى وسط الاستنبات خورت خلايا الليشمانيا بهذه البنى باستعمال التثقيب الكهربائي وتم انتقاء الخلايا المحورة بالاعتماد على واسمة انتقاء موجودة ضمن الحامل. وتم التأكد من إنتاج البروتينات المؤشبة بوساطة تقانة ELISA، ومن ثم تم التحقق من فعاليتها الحيوية من خلال قدرتها على زيادة عيوشية خلايا الخط الخلوي 7-MCF وخلايا طفيليات الليشمانيا عند معالجتها بها. يُعد هذا العمل المحاولة الأولى لإنتاج بروتين IGFI البشري بشكل مؤشب في نظام جديد يتجاوز صعوبات ومحدوديات إنتاجه في البكتيريا. الكلمات المفتاحية: حامل IGFI PLEXSY، الليشمانيا، التنسيل