إنتاج البروتين الخاص بالمشيمة PLAC1 باستعمال التقانات الحيوية

Abstract

يعد البروتين الخاص بالمشيمة PLACI أحد أهم المستضدات السرطانية الخصيوية CTAS. يتميز بتعبيره المرتفع والمرتبط بالغشاء وآثاره المهمة في تطور طيف واسع من السرطانات وخباثتها، وأهميته واسماً تشخيصياً وإنذارياً دقيقاً وهدفاً علاجياً فعالاً للعلاجات المناعية المستهدفة لعدة سرطانات. إلا أن محدودية الدراسات التي أنتجته بشكله الصحيح والمنحل وجهتنا في هذه الدراسة إلى محاولة إنتاجه بشكله الصحيح والمنحل خطوة أولى في طريق إنتاج كواشف تشخيصية دقيقة لسرطانات متعددة وخاصة سرطان البروستات جرى تنسيل الإطار المفتوح للقراءة للجين ORFplac1 ) place) ضمن البلاسميد pRSET، ومن ثم أمثلة شروط إنتاج PLACI في السلالة البكتيرية (E.coli BL21 (DE3 تنقيته باستخدام حبيبات كروماتوغارفيا الألفة المعدنية IMAC، التأكد منه عن طريق الرحلان الكهربائي من نمط SDS-PAGE والتبصيم وسترن WB، وقياس تركيزه وبالنتيجة، بنيت بنية بلاسميدية مؤشبة pRSET-plac1 صحيحة وأنتج البروتين المؤشب PLACI النقي بشكله المنحل بكتلة جزيئية نسبية 26K Da دون استخدام أي مواد ممسحة، وبتركيز 12.448 في كل مل من المستنبت البكتيري، بالمجمل، قدمت استراتيجية سهلة وقليلة التكلفة لإنتاج البروتين المؤشب PLACI بشكل صحيح منحل.