الكشف الجزيئي لفيروسات نحل العسل المنقولة بواسطة الفاروا ودور بعض المستخلصات النباتية في تحفيز الجهاز المناعي لنحل العسل

Abstract

هدفت هذه الدراسة للكشف عن فيروسات نحل العسل المنتشرة في سورية، وتوصيفها جزيئيا، والمعرفة دور بعض المستخلصات النباتية في تحفيز (تقوية) الجهاز المناعي لنحل العسل Apis mellifera شمل المسح الحقلي 35 منحلاً من ثمان محافظات سورية دمشق، ريف دمشق القنيطرة، السويداء، حمص، حماه، طرطوس واللاذقية. جمع 240 عينة من نحل العسل (180) عينة أبدت أعراض إصابة، 60 عينة لم تبد أعراض إصابة) و 35 عينة من أكاروس الفاروا Varroa destructor خلال الفترة الواقعة بين آذار وتشرين أول من الأعوام (2014) حتى (2017)، استخدم مجموعة من البادئات المتخصصة بالكشف عن أكثر فيروسات نحل العسل انتشاراً في العالم.

أظهرت تقنية النسخ العكسي وتفاعل البلمرة التسلسلي RT-PCR انتشار أربعة فيروسات تصيب نحل العسل في سورية، وهي فيروس الجناح المشوه DWV، وفيروس شلل النحل الحاد ABPV، وفيروس تكيس الحضنة SBV، وفيروس شلل النحل المزمن CBPV، وبلغت نسبة الإصابة 88.73%، 15.42% %10.42، %7.5 على التوالي. كان فيروس الجناح المشوه أكثر انتشاراً في جميع المحافظات المدروسة تلاه فيروس شلل النحل الحاد في محافظات دمشق ريف دمشق حمص وحماه، ثم فيروس شلل النحل المزمن في محافظات دمشق، ريف دمشق وحمص)، وأخيراً فيروس تكيس الحضنة في محافظتي حمص وحماه أظهرت شجرة القرابة الوراثية لفيروس الجناح المشوه وفيروس شلل النحل المزمن عدم وجود للجغرافية أي تأثير في توزع العزلات المحلية والعالمية، وتأثيراً واضحاً للجغرافية في توزع العزلات المحلية والعالمية عند فيروس شلل النحل الحاد وفيروس تكيس الحضنة.

بلغ حجم الجينوم الكامل للعزلة السورية من فيروس الجناح المشوه 10.165 تكليوتيد (nt). كانت نسبة الأدنين 29.4%، والسيتوزين %15.9%، والغوانين 22.5%، واليوراسيل 32.1% تألف الجينوم من إطار قراءة مفتوح واحد مؤلف من 8.682 نكليوتيد. يشفر لبروتين متعدد مكون من 2.892 حمضاً أمينياً. سبق إطار القراءة المفتوح في الاتجاهين منطقتين غير قابلتين للترجمة الأولى عند النهاية 5 تألفت من 1.144 نكليوتيد، والثانية عند النهاية 3 تألفت من 319 نكليوتيد تلاها مباشرة ذيل متعدد الأدنين. حددت عشرة مواقع لعمل أنزيم البروتياز تقع ضمن إطار القراءة المفتوح. أوضحت شجرة القرابة الوراثية لكامل الجينوم تقارباً عالياً بين العزلة السورية والعزلات العالمية لفيروس الجناح المشوه، كما بينت أن العزلة السورية تتبع للنمط Type A

كانت أعلى نسبة إصابة بفيروسين معا 16.7% (40) عينة) عند الإصابة بـ (DWV+ABPV)، وأقل نسبة إصابة 0.8% (2) عينة) عند الإصابة بـ (SBVCBPV). أما نسبة الإصابة بثلاثة فيروسات معا

1

فتراوحت بين 0.8% (2) عينة) عند الإصابة بـ (SBVABPVCBPV)، و 5.4% (13) عينة) عند )DWV+ABPV+CBPV( الإصابة بـ

بينت نتائج الكشف الجزيئي عن الفيروسات في أكاروس الفاروا عن وجود فيروس الجناح المشوه بنسبة 74.29%، وفيروس شلل النحل الحاد بنسبة 20% كان الارتباط معنوياً وقوياً بين فيروس الجناحالمشوه وأكاروس الفاروا وبلغ 76 - ، أما معامل التحديد فبلغ 57.76%، أما الارتباط بين فيروس شلل النحل الحاد وأكاروس الفاروا فكان ضعيف غير معنوي -0.34 = r ومعامل التحديد 11.56%.

ازدادت نسبة الإصابة الفيروسية من الفيروسات المنتشرة في سورية بشكل طردي خلال سنوات الدراسة (2014) حتى 2017). أما التغيرات الفصلية فكان أعلى نسبة إصابة في فصل الخريف 91.2% الفيروس DWV، و 30.59% في فصل الصيف لفيروس شلل النحل الحاد، و 15.38% و 21.54% على التوالي لفيروس شلل النحل المزمن وفيروس تكيس الحضنة في فصل الربيع.

كان هناك تبايناً في سمية المستخلصات النباتية المستخدمة حيث تراوحت بين 117.25 جزء بالمليون عاملة عند استخدام زيت نبات الشيخ الأبيض و 476.1 جزء بالمليون عاملة عند استخدام المستخلص المائي الأوراق نبات المليسة. كما أبدت المستخلصات النباتية تأثيراً معنوياً على متوسط ووسيط طول فترة حياة عاملة النحل مقارنة بالشاهد.